1、用途：分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和波長(zhǎng)重復(fù)性是分光光度計(jì)重要的技術(shù)指標(biāo)，每年至少要進(jìn)行一次檢定測(cè)試。鈥玻璃是分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和重復(fù)性檢定常用的檢具之一，每一片鈥玻璃都附有標(biāo)準(zhǔn)的波長(zhǎng)值，通過實(shí)際測(cè)量分光光度計(jì)波長(zhǎng)值，并拿測(cè)量值減去標(biāo)準(zhǔn)值，得出該臺(tái)分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)度值，從而判斷該臺(tái)儀器是否合格。

2、實(shí)驗(yàn)程序:在分光光度計(jì)整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)按每大約100 nm左右選擇一個(gè)波長(zhǎng)點(diǎn)選用透射比方式，以空氣作參比測(cè)量氧化鈥玻璃的吸收峰波長(zhǎng)。單方向?qū)γ恳唤M譜線(或吸收峰)按波長(zhǎng)順序依次測(cè)量，測(cè)量三次，每個(gè)波長(zhǎng)三次測(cè)量值的平均值與參考波長(zhǎng)標(biāo)稱值之差為單波長(zhǎng)誤差，單波長(zhǎng)誤差中的大值為波長(zhǎng)準(zhǔn)確

度；每個(gè)波長(zhǎng)三次測(cè)量值的大值與小值之差為單波長(zhǎng)重復(fù)性，所有單波長(zhǎng)重復(fù)性之中的大值為儀器的波長(zhǎng)重復(fù)性。

3、實(shí)驗(yàn)方法：

3.1非自動(dòng)掃描型分光光度計(jì)

1）選取儀器透射比測(cè)量模式，

2）波長(zhǎng)調(diào)整到標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)前3個(gè)nm處，

3）用空氣作空白調(diào)整儀器透射比為100%

4）把鈥玻璃濾光片放入樣品架內(nèi)第二個(gè)槽里面，（*個(gè)槽為參比槽）；

5）然后將鈥玻璃濾光片拉入光路中，并記錄此時(shí)透射比的讀數(shù)；

6）往高波長(zhǎng)處調(diào)整0.1-0.5nm波長(zhǎng)值（波長(zhǎng)準(zhǔn)確度在±2nm的調(diào)整0.5nm; 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度在±1nm的調(diào)整0.2nm；波長(zhǎng)準(zhǔn)確度在±0.5nm的調(diào)整0.1nm）.

7）重復(fù)步驟3）-5）直致測(cè)量出相對(duì)小透過率，即為該波長(zhǎng)處的實(shí)測(cè)波長(zhǎng)值。

8）重復(fù)測(cè)量三次大波長(zhǎng)值-小波長(zhǎng)值即為波長(zhǎng)重復(fù)性。

3.2 自動(dòng)掃描型分光光度計(jì)

1）測(cè)試波長(zhǎng)范圍設(shè)置為230-650nm，掃描間距（采樣間距）為0.1nm，掃描速度為低俗，測(cè)量模式為透過率；

2）對(duì)空氣校準(zhǔn)儀器空白；

3）把放入樣品架內(nèi)第二個(gè)槽里面，（*個(gè)槽為參比槽）

4）掃描

5）檢索并記錄透光率小峰值

6）重復(fù)測(cè)量三次大波長(zhǎng)值-小波長(zhǎng)值即為波長(zhǎng)重復(fù)性。

4、鈥玻璃參考波長(zhǎng)

注：編號(hào)1、5、7、11、12五個(gè)波長(zhǎng)為優(yōu)先選用波長(zhǎng)